葡萄逆境胁迫诱导启动子的克隆及表达分析
来源：华北农学报杂志2016年第1期北京时间：
作者：吕兆勇, 赵春梅, 薛仁镐
单位：1. 聊城市人民医院, 山东聊城 252000;；2. 青岛农业大学生命科学学院, 山东青岛 266109
摘要：为了研究葡萄抗逆基因(CAN70200.1)的表达特性,采用PCR技术从葡萄中克隆了CAN70200.1基因上游一段长度为1354 bp的启动子片段,命名为PCAN。采用PlantCARE和PLACE启动子在线预测工具分析表明,PCAN启动子序列具有CAAT-box、TATA-box基本的顺式作用元件和一些参与非生物胁迫、光和植物激素应答相关的顺式作用元件。为验证启动子的表达特性,将PCAN启动子连接到pCAMBIA1391Z载体GUS基因的上游,构建成植物表达载体p1391Z-CAN,并通过农杆菌介导法转化烟草,经PCR鉴定,获得转基因植株。对转基因烟草植株进行逆境胁迫处理发现,在干旱处理120 min后,PCAN启动子活性达到最强;而4℃低温处理30~60 min时,PCAN启动子活性达到最强,表明PCAN启动子具有低温和干旱胁迫诱导表达特性。
关键词：葡萄,P<sub>CAN</sub>启动子,胁迫诱导表达,GUS检测,
基金资助：转基因生物新品种培育重大专项(2014ZX08010002-003-002);山东省自然科学基金项目(ZR2013CM025)
