烟草脱水素基因NtDEH1的克隆及研究

来源：华北农学报杂志2016年第1期北京时间：

作者：罗岸, 詹领

单位：1. 长江大学生命科学学院, 湖北荆州 434023;；2. 武汉大学生命科学学院, 湖北武汉 430072

摘要：为研究脱水素在植物早期胚胎发育中的作用和机理,采用显微操作技术获得烟草卵细胞并构建其cDNA文库,从中筛选到一个脱水素基因NtDEH1。通过RACE技术获得该基因全长,基因组测序结合生物信息学分析表明该基因拥有一段长度为651 bp的完整开放阅读框和一段535 bp的内含子,编码由217个氨基酸残基组成的蛋白质,其理论等电点为5.27,属于酸性蛋白,且具有一定的亲水性。氨基酸序列比对分析发现在许多物种比如绒毛状烟草、林烟草、甜辣椒、番茄、马铃薯和丹参中都具有与NtDEH1蛋白非常类似的保守的同源序列,均具有SK2型脱水素特征。借助Genome walking技术获取NtDEH1基因约1706 bp的5'侧翼序列,使用小叶烟草瞬时表达系统检测到其具有较强的启动子活性。该研究为进一步了解脱水素基因NtDEH1在植物生殖发育中的具体功能打下基础。

关键词：烟草,脱水素,基因克隆,<em>NtDEH1</em>,启动子,卵细胞,

基金资助：长江大学自然科学基金项目(2014NSFY023)