沙拉沙星单克隆抗体制备及鉴定

来源：华北农学报杂志2016年第2期北京时间：

作者：刘儒彪, 胡骁飞, 张改平, 王慧, 王方雨, 刘璐, 刘玺, 邓瑞广, 宋照军

单位：1. 河南科技学院 食品学院, 河南 新乡 453003;；2. 河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室, 河南 郑州 450002;；3. 河南农业大学 牧医工程学院, 河南 郑州 450002

摘要：为制备敏感性好、亲和力高、特异性强的抗沙拉沙星(Sarafloxacin,SARA)单克隆抗体,采用碳二亚胺法合成SARA人工抗原,通过免疫BALB/c小鼠,选择血清效价高且敏感性好的小鼠,采用杂交瘤细胞技术进行细胞融合,筛选分泌抗SARA单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb)的杂交瘤细胞株;采用体内诱生腹水法制备SARA mAb,通过间接ELISA和间接竞争ELISA对SARA mAb的免疫学特性进行鉴定。结果表明:小鼠经免疫原免疫后,小鼠多抗血清效价均达到1:128000。选择敏感性较好的2号小鼠进行细胞融合,经多次亚克隆后,筛选出1G3、3H3两株杂交瘤细胞株,其中1G3所产SARA mAb效价较高,为1:512000,IC50为6.34 ng/mL,亲和常数为8.55×108 L/mol,与诺氟沙星的交叉反应率为1.06%,与其他药物交叉反应率均低于0.50%。

关键词：沙拉沙星,单克隆抗体,杂交瘤细胞,免疫学特性,

基金资助：2015年河南省科技攻关项目(152102310094);河南省高校科技创新团队支持计划项目(13IRTSTHN006)