猪博卡病毒不同基因型三重PCR检测方法的建立及初步应用

来源：华北农学报杂志2016年第2期北京时间：

作者：宏春慧, 杨兵, 覃湘婕, 周宏专, 徐福洲, 苏霞, 薛静, 张晓东, 王金洛

单位：1. 北京农学院 动物科学技术学院, 北京 102206;；2. 北京市农林科学院 畜牧兽医研究所, 畜禽疫病防控技术 北京市重点实验室, 北京 100097;；3. 北京农业生物技术研究中心, 北京 100097

摘要：为鉴别猪博卡病毒1型、2型和3型3种基因型,根据猪博卡病毒基因序列分别设计3对针对保守区域的引物进行PCR扩增,扩增目的片段大小分别为645 bp (PBoV1型)、352 bp(PBoV2型)和259 bp(PBoV3型)。通过引物浓度和退火温度等条件优化,首次建立了同时检测猪博卡病毒3种基因型的三重PCR方法。所建立的三重PCR方法扩增其他猪病病毒结果均为阴性,最低检测限为8×10-7 ng/μL。结果表明,该方法具有较好的特异性和敏感性。对临床样品进行三重PCR和单项PCR检测,对比结果显示符合率为100%。该方法的建立为猪博卡病毒3种不同基因型的鉴别检测提供了有效手段。

关键词：猪博卡病毒,基因型,三重PCR,检测,

基金资助：北京市农林科学院科技创新能力建设专项(KJCX20140409);北京市科技计划项目(Z131100003113015)