花粉致死基因ZmAA1对玉米遗传转化的研究

来源：华北农学报杂志2016年第3期北京时间：

作者：孟令聪, 宋广树, 吕庆雪, 刘宏伟, 张志军, 李春雷, 王敏, 刘文国

单位：1. 吉林吉农高新技术发展股份有限公司, 吉林 公主岭 136100;；2. 吉林省农业科学院, 吉林 长春 130124

摘要：为了研究花粉致死基因ZmAA1的功能,进而创制转ZmAA1基因玉米不育新材料。在GenBank中找到花粉致死基因ZmAA1及启动子Pg47,并在目的片段的上下游设计増加酶切位点,基因合成构建到克隆载体puc57上,采用传统酶切连接的方法构建了植物表达载体pCAMBIA3300-Pg47-ZmAA1-35S-bar,并利用农杆菌介导法转化优良玉米自交系郑58萌动胚。成功构建植物表达载体pCAMBIA3300-Pg47-ZmAA1-35S-bar;共获得94株除草剂抗性植株,其中47株目的片段PCR呈阳性反应,对温室中表现为花粉败育的PCR阳性植株进行目的片段及筛选标记bar基因RT-PCR与蛋白免疫学试纸条检测,结果表明,花粉致死基因ZmAA1及启动子Pg47已经整合到玉米基因组并表达。

关键词：玉米,<em>ZmAA1</em>基因,启动子<em>Pg47</em>,遗传转化,

基金资助：吉林省科技厅产业技术创新战略联盟项目(20140309005NY);国家支撑计划项目(204BAD01B01)