盾叶半夏凝集素基因的克隆及功能分析

来源：华北农学报杂志2016年第3期北京时间：

作者：杨在君, 刘玲玲, 彭正松

单位：1. 西华师范大学 生命科学学院, 西南野生动植物资源保护教育部重点实验室, 四川 南充 637009;；2. 重庆大学 生物工程学院, 生物流变科学与技术教育部重点实验室, 重庆 400044

摘要：为克隆盾叶半夏凝集素基因,并对其功能进行分析。采用RACE技术从盾叶半夏中克隆得到盾叶半夏凝集素基因的全长cDNA序列,命名为ppl。同时,构建了ppl基因的原核表达载体,并成功实现了33kDa重组蛋白在E.coli BL21中的表达。纯化后的重组蛋白PPL用于凝血和体外抗癌试验。该基因的全长cDNA序列为1504bp,其中开放性阅读框(ORF)813 bp,编码270个氨基酸,具有3个甘露糖结合识别位点。PPL具有凝血活性,这种凝血活性可受甘露糖抑制。PPL对人鼻咽癌细胞(CNE)、人宫颈癌细胞(Hela)及人乳腺癌细胞(Bcap-37)的生长均具有抑制作用,其中对Hela细胞的抑制效果最好。为进一步研究PPL蛋白的功能奠定了理论基础。

关键词：盾叶半夏,凝集素,基因克隆,功能分析,

基金资助：西华师范大学博士科研启动项目(11B017)