枯草芽孢杆菌BSD-2的GFP标记及其在黄瓜上的定殖研究

来源：华北农学报杂志2016年第4期北京时间：

作者：郝慧娟, 刘洪伟, 尹淑丽, 刘倩倩, 张丽萍, 宋水山

单位：1. 河北工业大学 化工学院, 天津 300130;；2. 河北省科学院 生物研究所, 河北 石家庄 050081;；3. 河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心, 河北 石家庄 050081

摘要：为研究枯草芽孢杆菌BSD-2在黄瓜植株上的定殖情况，采用稍加改进的电击转化方法将含有GFP基因的pGFP4412质粒导入枯草芽孢杆菌BSD-2菌株中，并测定了其生长曲线、质粒遗传稳定性及其对枯萎病菌和灰霉病菌的抑制作用。结果表明，成功获得具有绿色荧光的菌株BSD-2-GFP；标记菌株的生长趋势与野生型菌株基本一致；在无选择压力条件下连续培养56 h，菌株BSD-2-GFP的遗传稳定性为86%；其对植物枯萎病菌和灰霉病菌具有很强的抑制作用，与野生型菌株相当。通过荧光显微镜观察发现，标记菌株处理24 h后即可在黄瓜根内部发现，5 d后可在叶脉发现，且50 d后仍可在叶脉观测到。结果表明，菌株BSD-2-GFP可以很好地在黄瓜体内定殖，从而阻止病原菌的侵入。

关键词：枯草芽孢杆菌,绿色荧光蛋白,枯萎病,灰霉病,抑菌作用,

基金资助：河北省重点基础研究项目（13966503D）；河北省省级省校科技合作开发资金支持项目（Y-15）；河北省科学院重点项目（2015302）