红鳍东方鲀SREBP-1和SREBP-2基因克隆及表达分析

来源：华北农学报杂志2016年第4期北京时间：

作者：张伟, 姬明丽, 郭前进, 千智斌

单位：新乡医学院 基础医学院, 河南 新乡 453003

摘要：为了研究红鳍东方鲀SREBP-1和SREBP-2基因的功能及在脂肪代谢中的分子机制，从红鳍东方鲀脂肪组织提取总RNA，反转录获得cDNA模板，利用设计的引物PCR扩增获得SREBP-1和SREBP-2开放阅读框（ORF），SREBP-1基因ORF区的cDNA序列长度为3 330 bp，编码1 109个氨基酸，SREBP-2基因ORF区的cDNA序列为3 444 bp，编码1 147个氨基酸。实时荧光定量PCR检测SREBP-1基因在红鳍东方鲀不同组织中的表达特征，结果表明，SREBP-1在脑组织中表达丰度最高，其次为眼、脂肪组织、肠、鳃、脾脏、心脏及肝脏，在肌肉中表达丰度最低。将SREBP-1连接到原核表达载体pET32a上，利用IPTG对重组质粒pET32a-SREBP-1在大肠杆菌Rosetta （DE3）进行诱导表达，SDS-PAGE电泳显示在141 kDa处有特异性的条带出现。

关键词：红鳍东方鲀,<em>SREBP</em>-<em>1</em>基因,<em>SREBP</em>-<em>2</em>基因,原核表达,

基金资助：河南省教育厅重点项目（14A310027）；新乡医学院高学历人才启动基金项目（505001）