玉米蛋白质组研究中双向电泳技术条件的优化

来源：华北农学报杂志2016年第4期北京时间：

作者：董婧, 逯晓萍, 吕二锁, 薛春雷, 李俊伟

单位：1. 内蒙古农业大学 农学院, 内蒙古 呼和浩特 010019;；2. 内蒙古农牧业科学院, 内蒙古 呼和浩特 010031

摘要：为了优化玉米叶片双向凝胶电泳技术条件，通过比较3种总蛋白提取方法对玉米双向电泳结果的影响，并对蛋白质上样量、IEF等电聚焦条件及SDS-聚丙烯酰胺凝胶浓度等参数进行探索、优化；结果发现，与酚提取法和磷酸缓冲液法相比，采用改进的TCA/丙酮法提取总蛋白操作简单、方便，所得的2-DE图谱中蛋白质点数量多、背景清晰，是一种适用于提取玉米苗期叶片总蛋白的有效方法；同时筛选出：第一向IEF等电聚焦样品上样量为800 μg，聚焦条件为20 000 V/h，在浓度为12.5%的SDS-聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳，能够在17 cm的IPG胶条上获得背景低、分辨率较高、重复性好的双向电泳图谱，该优化体系适用于玉米叶片蛋白质组双向电泳分离，对玉米蛋白质组学研究具有重要参考价值。

关键词：玉米,叶片,蛋白质提取,双向电泳,

基金资助：内蒙古自治区科学技术项目（20131410）；内蒙古呼和浩特科学技术项目（2013-重-计-1）