甘蓝型油菜异三聚体G蛋白原生质体瞬时表达体系的建立

来源：华北农学报杂志2016年第6期北京时间：

作者：陈云, 于一帆, 潘淑芬, 周研, 葛会敏, 刘立军

单位：扬州大学 江苏省作物遗传生理重点实验室, 江苏 扬州 225009

摘要：为建立甘蓝型油菜异三聚体G蛋白各组分原生质体瞬时表达体系，以油菜叶片为试材，从试材选取、平摇时间和聚乙二醇浓度方面优化了油菜原生质体制备条件和转化条件。结果表明，选取30 d苗龄叶片、平摇10 min时原生质体游离状态最佳，产量为10.73×106/mL，活力可达96.4%。采用30% PEG转化原生质体时，目的蛋白表达量最高。Western Bolt的检测分析表明，异三聚体G蛋白各组分均参与了甘蓝型油菜对ABA的应答反应，当ABA浓度分别为100，150，100，50 mmol/L时，BnGA1、BnGB1、BnGG2和BnRGS1蛋白的表达量最高。

关键词：油菜,原生质体瞬时表达,异三聚体G蛋白,

基金资助：国家自然科学基金项目（31371562；30970249）