甘蓝型油菜PEPC基因ihpRNA表达载体的构建与遗传转化研究

来源：华北农学报杂志2016年第6期北京时间：

作者：邢蔓, 谭太龙, 李健, 邬贤梦, 官春云, 熊兴华

单位：1. 湖南农业大学 作物基因工程湖南省重点实验室, 湖南 长沙 410128;；2. 国家油料改良中心湖南分中心, 湖南 长沙 410128

摘要：为提高油菜含油量，构建了基于油菜磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因（PEPC）的ihpRNA植物表达载体。分别从甘蓝型油菜基因组中克隆了种子储藏蛋白napin基因启动子（315 bp）、PEPC基因的外显子片段（246 bp）及PEPC基因的内含子（754 bp），包含了其剪切位点之前4 bp和之后18 bp片段。通过中间载体pBluescript Ⅱ SK（+）再构建到pBI121中，构成种子特异表达的内含子剪接的PEPC基因的RNA干扰载体pBI121.NP+IP-。利用农杆菌介导法对湘油15号进行遗传转化，获得卡那霉素抗性转化植株9株，PCR检测证实外源片段成功导入其中7株油菜基因组中。对T2种子中含油量检测发现比对照提高10%左右。

关键词：甘蓝型油菜,<em>PEPC</em>基因,ihpRNA载体,转基因油菜,含油量,

基金资助：国家“973”计划项目（2015CB150200）；湖南省科技计划项目（2014FJ1006-3）