药材甲热激蛋白Hsp90基因的克隆及高温胁迫下的表达

来源：华北农学报杂志2016年第S1期北京时间：

作者：许抗抗, 严毅, 蔡兴颖, 李灿, 杨文佳

单位：贵阳学院 生物与环境工程学院, 有害生物控制与资源利用贵州省高校特色重点实验室, 贵州 贵阳 550005

摘要：克隆药材甲热激蛋白90（Heat shock protein 90，Hsp90）基因并探讨其对高温胁迫适应性的分子机制，采用生物测定法研究了药材甲的热激存活率，并采用RT-PCR技术克隆了药材甲Hsp90基因的cDNA全长序列（GenBank登录号：KX356691），命名为SpHsp90，通过实时定量PCR技术检测其在高温胁迫后的表达量变化。结果显示，药材甲成虫的存活率随温度的升高而明显下降，44℃热激处理可导致成虫全部死亡。药材甲SpHsp90基因开放阅读框全长2 172 bp，编码723个氨基酸，理论分子量和等电点分别为82.6 kDa和5.01。SpHsp90具有Hsp90蛋白家族的5个签名序列和胞质特征序列MEEVD，并与其他昆虫HSP90具有较高的氨基酸相似性。实时定量PCR结果表明，38，40，42℃高温胁迫2 h后，药材甲成虫体内SpHsp90的表达量明显高于对照组。这说明SpHsp90在药材甲抵抗高温胁迫过程中起着重要的作用。

关键词：药材甲,热激蛋白,基因克隆,表达模式,

基金资助：贵州省高层次创新型人才培养（黔科合人才[2016]4020）；贵州省科学技术基金联合基金项目（黔科合LH字[2014]7167）；贵阳学院高层次人才科研启动费（校人才2014003）；国家级大学生创新创业训练计划项目（201510976024）