柠条锦鸡儿CkLEA4-1基因的克隆及表达分析

来源：华北农学报杂志2017年第2期北京时间：

作者：滑璐玢, 于秀敏, 杨杞, 王瑞刚, 宝力德

单位：内蒙古农业大学 生命科学学院, 内蒙古 呼和浩特 010018

摘要：为研究胚胎发育晚期蛋白（LEA）在柠条中的生物学功能，从已构建的柠条锦鸡儿干旱胁迫抑制削减杂交文库中筛选到一条LEA蛋白编码基因，并采用RT-PCR法进行克隆。所得LEA基因的开放阅读框（ORF）长1 119 bp，编码373个氨基酸的蛋白质，命名为CkLEA4-1。结合序列比对与系统进化分析结果，推断CkLEA4-1属于5族LEA蛋白。利用实时荧光定量PCR技术对CkLEA4-1在干旱、高盐等逆境胁迫条件下的表达情况进行初步研究，结果表明，CkLEA4-1受到不同程度的诱导，推测该基因可能与柠条锦鸡儿响应逆境胁迫有关。研究还成功构建了CkLEA4-1的过表达载体pCanG-CkLEA4-1，得到转基因纯合体株系，为进一步研究柠条锦鸡儿CkLEA4-1基因的功能提供了材料。

关键词：柠条锦鸡儿,LEA,基因克隆,表达分析,

基金资助：国家自然科学基金项目（31560199；31360169）；内蒙古自治区科技创新团队（201503004）；内蒙古自治区草原英才团队