葡萄肌醇半乳糖苷合成酶基因VvGolS2-4的克隆及表达特性分析

来源：华北农学报杂志2017年第2期北京时间：

作者：冯睿杰, 侯丽霞, 郭扬, 马倩, 刘新

单位：青岛农业大学 生命科学学院, 山东省高校植物生物技术重点实验室, 山东 青岛 266109

摘要：为了研究葡萄肌醇半乳糖苷合成酶基因家族的特性，以抗低温品种左优红组培苗为材料，通过同源克隆技术，获得VvGolS2、VvGolS3和VvGolS4全长CDS，对其序列进行了生物信息学分析，同时利用实时定量PCR技术探究了3个基因的组织表达特性和响应逆境因子及相关信号分子的特性。结果显示：3个基因cDNA大小分别为954，978，1 011 bp，分别编码317，325，336个氨基酸序列；3个蛋白分子量分别为36.65，36.97，38.12 kDa；等电点分别为5.12，5.33和5.16，且均在C端含有一个疏水的五肽APXAA；实时荧光定量PCR证明，3个GolSs在葡萄不同组织中表达情况不同，VvGolS2和VvGolS4在叶片中表达量最高，而VvGolS3则在花和卷须中表达量最高；不同逆境因子及逆境信号分子均会影响VvGolS2、VvGolS3和VvGolS4基因的表达量，其中VvGolS2和VvGolS4基因的表达受盐诱导最明显，VvGolS3基因的表达受低温诱导最明显；另外，胁迫信号分子乙烯、过氧化氢和脱落酸均可诱导VvGolS2基因表达量上升，而VvGolS3基因的表达受脱落酸和乙烯的诱导，乙烯、过氧化氢和硫化氢则均可诱导VvGolS4基因表达量上升。综上推测，3个VvGolSs均与葡萄抵御逆境胁迫相关，但各自功能可能有所不同。

关键词：葡萄,肌醇半乳糖苷合成酶基因,基因克隆,表达特性分析,

基金资助：国家自然科学基金项目（31572107；31540090；31401844）