掌叶半夏凝集素基因的克隆及亚细胞定位分析

来源：华北农学报杂志2017年第2期北京时间：

作者：赵欢

单位：西华师范大学 生命科学学院, 四川 南充 637009

摘要：为了克隆掌叶半夏凝集素基因（Pinellia pedatisecta agglutinin，PPA），并对其进行生物信息学分析和亚细胞定位。采用PCR技术扩增掌叶半夏凝集素基因的ORF序列，构建pCAMBIA1300-35S-PPA-eGFP重组载体，导入农杆菌GV3101并在烟草中进行瞬时表达，采用激光扫描共聚焦显微镜观察其亚细胞定位。克隆获得的PPA基因全长由777个核苷酸组成，编码258个氨基酸，含有3个甘露糖结合位点和2个保守的B-lectin结构域，GenBank登录号为KF154981，氨基酸序列登录号为AGV40779。序列比对表明，该序列与天南星、滴水珠、花南星和半夏凝集素的氨基酸序列相似性分别为96%，91%，86%和83%。亚细胞定位的结果表明，pCAMBIA1300-35S-PPA-eGFP融合蛋白在细胞核内无分布，而是点状分布在细胞质膜上。为进一步解析掌叶半夏凝集素基因的结构与功能，开展掌叶半夏凝集素抗病虫害机制的研究奠定基础。

关键词：掌叶半夏,掌叶半夏凝集素,基因克隆,亚细胞定位,

基金资助：四川省教育厅重大培育项目（15CZ0015）；西华师范大学青年教师资助专项（1D012）；西华师范大学青年教师资助专项（14D012）