沙冬青C2H2型锌指蛋白基因AmZFP1的克隆与表达分析

来源：华北农学报杂志2017年第2期北京时间：

作者：任美艳, 王志林, 郭慧琴, 薛敏, 殷玉梅, 王茅雁

单位：内蒙古农业大学 生命科学学院, 内蒙古 呼和浩特 010018

摘要：为了研究强抗逆植物沙冬青寒旱诱导表达基因AmZFP1（Zinc finger protein 1）的生理功能，通过转录谱分析，从中鉴定出一个受寒旱诱导的ZFP全长cDNA序列并命名为AmZFP1。利用半定量RT-PCR方法对AmZFP1进行了表达分析，结果表明，在室内正常培养的沙冬青幼苗中该基因有较高表达量，在低温或干燥处理2~48 h其表达量明显上调，尤其以干燥处理上调速度更快且上调幅度略高；在野外自然生长植株的嫩叶、花蕾和幼嫩果荚中AmZFP1均有较明显的表达，而在嫩枝和根中检测不到其转录本；在野外植株的嫩叶中，AmZFP1在严冬季节高表达，而在春、夏、秋温热季节表达水平低或很微弱。利用RT-PCR方法克隆到AmZFP1编码区cDNA（816 bp），推测其编码蛋白含有2个典型C2H2型锌指结构域及一个核定位信号。此外成功将该cDNA片段构建到植物表达载体p3300-353T上，为下一步深入开展该基因功能研究奠定了基础。

关键词：沙冬青,锌指蛋白,表达分析,基因克隆,

基金资助：内蒙古自然科学基金重大项目（2012ZD02）；内蒙古自然科学基金面上项目（2014MS0326）；国家自然科学基金项目（30960158）