利用微滴式数字PCR技术分析转基因玉米抗除草剂标记基因EPSP拷贝数

来源：华北农学报杂志2017年第3期北京时间：

作者：王犇, 张春, 李向龙, 张中保, 邹华文, 吴忠义

单位：1. 长江大学 农学院, 主要粮食作物产业化湖北省协同创新中心, 湖北 荆州 434023;；2. 北京市农林科学院 北京农业生物技术研究中心, 北京市农业基因资源和生物技术重点实验室, 北京 100097

摘要：基于微滴式数字PCR（Droplet digital PCR，ddPCR）平台，以转基因玉米为例，建立了转基因作物（Genetically modified crops，GM crops）外源基因拷贝数分析方法，对待测样品进行了快速鉴定，并从T0转基因玉米株系中鉴定出多个单拷贝单株。对该方法与实时荧光定量PCR（Quantitative real-time PCR，qRT-PCR）方法在分析结果的准确性方面进行了比较，从试验数据可以看出，2种检测方法的结果比较一致，单拷贝检测结果高度一致；但是ddPCR试验操作更加简便，试验结果可重复性强，试验数据更加准确可靠。研究表明，ddPCR方法是一种更加便捷、快速和准确的外源基因拷贝数分析新方法，基于其在准确性和灵敏度方面的显著优势，将会在转基因作物的外源基因拷贝数分析中得到广泛的应用。

关键词：微滴式数字PCR,转基因玉米,外源基因,拷贝数,绝对定量,

基金资助：国家转基因重大专项重点课题（2014ZX0800303B）；北京市农林科学院科研能力创新项目；北京市科委项目（Z171100001517001）