大豆CHI1基因启动子的克隆及功能初探

来源：华北农学报杂志2017年第4期北京时间：

作者：赵春梅, 范习, 薛仁镐

单位：青岛农业大学 生命科学学院, 山东省高校植物生物技术重点实验室, 山东 青岛 266109

摘要：为了解大豆Class Ⅰ几丁酶基因（Chitinase gene）对不同胁迫响应的分子机制。利用PCR技术克隆了大豆Class Ⅰ Chitinase基因的启动子片段（GmCHI1p），序列分析表明，扩增片段（1 641 bp）与GenBank中的已知序列同源性达99.8%，且含有多个胁迫响应调控元件。利用GUS基因上游无启动子的表达载体pCAMBIA1391Z，构建GmCHI1p与GUS基因融合的植物表达载体pCAM-GmCHI1p，并通过农杆菌介导法导入烟草中。在转基因烟草愈伤组织中检测到GUS活性，表明该启动子具有启动活性。对转基因烟草中的GUS活性进行初步定性分析，结果表明，GmCHI1p可驱动GUS基因在转基因烟草的根部特异性表达，而且在伤害处理的叶片中检测到GUS的强烈表达，表现出明显的根组织特异性及伤害诱导性。这种伤害诱导仅在伤害组织部位及其附近高效表达而没有被长距离传递，预计该启动子在转基因抗虫分子育种中具有巨大的应用前景。

关键词：几丁质酶,启动子,根特异性,伤害诱导性,

基金资助：转基因生物新品种培育重大专项资助项目（2014ZX08010002-003-002）；山东省自然科学基金项目（ZR2013CM025）