牡丹PsSPL3基因的克隆和表达特性分析

来源：华北农学报杂志2017年第4期北京时间：

作者：战新梅, 管世铭, 张玉喜

单位：青岛农业大学 生命科学学院, 山东省高校植物生物技术重点实验室, 山东 青岛 266109

摘要：SPL （SQUAMOSA promoter-binding protein-like）转录因子在植物多个生理过程中发挥重要的生理功能，为了研究其在牡丹花芽休眠进程中的作用机理，采用RACE方法，从牡丹花芽中克隆得到了一个SPL基因。该基因全长cDNA 1 057 bp，完整开放阅读框为549 bp，编码182个氨基酸，Blast分析表明，编码的氨基酸序列中具有SBP-box基因家族所特有的SBP-box保守结构域。与拟南芥已知SPLs蛋白构建进化树结果表明，牡丹SPL蛋白与AtSPL3聚为一支，该基因被命名为PsSPL3。生物软件预测PsSPL3蛋白分子量为20.349 4 kDa，理论等电点为9.62。同源性分析了牡丹PsSPL3与其他已知植物的SPL3，相似性为47.98%~69.46%，其中与白桦的SPL3蛋白相似性最高，为69.46%。实时定量PCR分析PsSPL3基因在初花期牡丹不同组织中和花芽休眠过程中的表达水平，结果表明，PsSPL3基因在不同组织中表达差异较大，其中在根中转录水平最高，在茎和花瓣中次之；PsSPL3基因在休眠进程中的转录水平呈先上升后下降趋势，其中低温处理14 d时，PsSPL3基因的表达量达到最高。低温7 d结合外源施加GA3的牡丹花芽中PsSPL3基因的表达量显著增加，推测PsSPL3基因的转录受GA3诱导来促进牡丹花芽内休眠解除的进程。

关键词：牡丹,<em>PsSPL3</em>,RACE,实时定量PCR,表达模式,

基金资助：国家自然科学基金面上项目（31471908；31372104；31672194）