甜菜双向电泳体系条件的优化

来源：华北农学报杂志2017年第5期北京时间：

作者：张辉, 白晨, 王华忠, 张惠忠, 李晓东, 付增娟, 赵尚敏, 鄂圆圆, 张自强, 王良

单位：1. 中国农业科学院, 北京 100081;；2. 内蒙古自治区农牧业科学院, 内蒙古 呼和浩特 010031;；3. 中国农业科学院 甜菜研究所, 黑龙江 哈尔滨 150080

摘要：为了获得甜菜叶片双向电泳中蛋白质最佳提取方法，建立甜菜叶片蛋白质双向电泳最佳的双向电泳体系。以甜菜叶片为材料，通过比较分析，研究甜菜叶片总蛋白提取方法、IPG胶条pH值及其对应上样量等因素对甜菜叶片蛋白质双向电泳结果的影响。结果表明：酚提取法、TCA/丙酮提取法和可溶性蛋白提取法3种蛋白提取方法中TCA/丙酮法提取效果较好，pH值4~7与pH值5~8的双向蛋白电泳比较发现：pH值4~7胶条蛋白点清晰且在图谱上的蛋白点分布均匀，无蛋白点集中现象，更适合甜菜叶片的蛋白质组分析。采用7 cm线性固相IPG胶条进行双向电泳，150 μg上样量蛋白点明显增多，双向电泳效果更好，pH值4~7的17 cm胶条300 μg上样量胶点更多更清晰，试验结果为甜菜蛋白质组学的研究提供了最佳的试验方法。

关键词：甜菜,蛋白质提取方法,双向电泳,体系优化,

基金资助：内蒙古自治区自然科学基金项目（2016MS0374）