噬菌体裂解酶结构域重构及其裂解功能分析

来源：华北农学报杂志2017年第6期北京时间：

作者：张辉, 周艳, 包红朵, 杨振泉, 朱如意, 周晨露, 张莉莉, 王冉

单位：1. 江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地, 江苏省农业科学院, 江苏 南京 210014;；2. 江苏省肉类生产与加工质量安全控制协同创新中心, 江苏 南京 210095;；3. 扬州大学 食品科学与工程学院, 江苏 扬州 225009

摘要：为了获得广谱噬菌体裂解酶，根据裂解酶结构及种属特异性，将金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶Ply187 CHAP及酶K的SH3b重新合成，并同时将末端引入单核细胞增生性李斯特菌噬菌体裂解酶LysZ5结合结构域，构建具有能够裂解金黄色葡萄球菌及李斯特菌的多功能裂解酶。SDS-PAGE结果表明，融合结构域的重构酶蛋白Ply187KS-Z5大小约为58 kDa，其在金黄色葡萄球菌及李斯特菌平板表面能够形成透明裂解圈。分析对金黄色葡萄球菌及李斯特菌在生肉表面的裂解活性表明，嵌合酶蛋白Ply187-KS能够有效裂解金黄色葡萄球菌，作用1 h后菌落数降至2.16 log，而重构酶Ply187KS-Z5不仅裂解金黄色葡萄球菌并同时能够裂解李斯特菌，且重构酶针对金黄色葡萄球菌噬菌体的裂解活性与Ply187-KS裂解效果相当，从而表明裂解酶结合结构域重组将是获得高效广谱裂解酶的新途径。

关键词：裂解酶,金黄色葡萄球菌,单核细胞增生性李斯特菌,

基金资助：国家自然科学基金项目（31671955）；江苏省农业科技自主创新资金项目（cx（13）3086）；江苏省自然科学基金项目（BK20161373）