陆地棉GhSAD2基因表达载体的构建、转化及抗寒性初步分析

来源：华北农学报杂志2017年第6期北京时间：

作者：蔡曼, 李卫华, 柳延涛, 余渝, 孔宪辉, 王娟, 王旭文, 刘丽

单位：1. 新疆农垦科学院 棉花研究所, 农业部西北内陆区棉花生物学与遗传育种重点实验室, 国家棉花改良中心 新疆生产建设兵团分中心, 新疆 石河子 832000;；2. 石河子大学, 新疆兵团绿洲生态农业重点实验室, 新疆 石河子 832003;；3. 新疆农垦科学院 作物研究所, 新疆 石河子 832000

摘要：为研究△9-硬脂酰-ACP脱氢酶基因的功能及其与植物抗寒性的相关性，以陆地棉GhSAD2基因（KX197920）为目的基因，构建植物表达载体pBI121-GhSAD2，将该表达载体通过电击法导入根癌农杆菌GV3101中，采用根癌农杆菌介导的叶盘法转化烟草。通过PCR和GUS活性染色鉴定外源GhSAD2基因是否导入并整合到烟草基因组上转录表达。将转pBI121-GhSAD2型和野生型烟草置于4℃下处理48 h后，检测其电解质渗漏率并观察其表型。研究结果证明目的基因GhSAD2已整合到烟草及棉花的基因组中，共获得转基因植株9株，转化率为75%。陆地棉GhSAD2基因能够显著增强非低温驯化植物烟草的抗寒性，从而提高植物细胞的低温防御能力，为进一步探究该基因的功能鉴定了基础。

关键词：陆地棉,<em>GhSAD2</em>基因,表达载体构建,遗传转化,

基金资助：国家自然科学基金项目（31360349）