药用野生稻ADF基因的克隆及其抗逆性分析

来源：华北农学报杂志2017年第6期北京时间：

作者：李培纲, 李红梅, 张帅, 李劲松, 陈志雄, 刘向东

单位：华南农业大学, 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室, 广东 广州 510642

摘要：为了研究ADF基因对药用野生稻非生物胁迫的影响，利用药用野生稻干旱胁迫转录组数据分析的基础，通过PCR技术克隆OoADF1基因，序列分析结果表明，OoADF1的开放阅读框长度为453 bp，无内含子，编码150个氨基酸残基，具有典型的ADF结构域。qRT-PCR技术分析表明，OoADF1在四叶期的叶片、叶鞘和根，以及抽穗期的叶片、叶鞘、茎和幼穗等7个组织中均表达，四叶期根部表达量最高，抽穗期叶鞘表达量最高。干旱和高盐胁迫后，OoADF1表达量分别上调了17.9，40.0倍。将OoADF1完整的编码序列融合到原核表达载体pET-28a（+）中，通过IPTG诱导及SDS-PASGE检测表明，OoADF1编码的蛋白分子量约为16 kDa，与预测的相符。OoADF1在大肠杆菌中的表达增加了大肠杆菌对高盐的抗性，表明OoADF1对高盐胁迫具有一定程度的响应能力，从而使得细胞免受高盐的毒害。

关键词：药用野生稻,水稻,抗逆性,ADF,

基金资助：国家自然科学基金项目（31271688）