四个苹果MdCBF基因克隆与表达分析

来源：华北农学报杂志2017年第S1期北京时间：

作者：靳芹, 代培红, 刘超, 胡芹华, 刘晓东, 李月

单位：新疆农业大学 农学院, 农业生物技术重点实验室, 新疆 乌鲁木齐 830052

摘要：为了筛选出苹果中的抗冻负调控基因，培育抗冻苹果新品种奠定基础，通过生物信息学的方法从苹果中克隆了4个具有完整开放阅读框的CBF基因，命名为MdCBFL1~MdCBFL4。通过与其他植物CBF/DREB蛋白氨基酸序列的多重比对发现，这4个蛋白具有CBF蛋白典型的结构特点，即1个AP2结构域，2个特征序列，即核定位信号区PKRPAGRTKFRETRHP和DSAWR保守序列。从系统进化树中可以看出苹果MdCBFL1~MdCBFL4蛋白与AtDREB1蛋白聚在A-1亚族，推测它与拟南芥A-1转录因子功能相似，MdCBFL1~MdCBFL4蛋白表达受干旱、盐碱、低温等逆境胁迫的诱导。采用半定量RT-PCR的方法检测分析苹果中MdCBFL1~MdCBFL4基因在高盐（200 mmol/L NaCl）、干旱和低温处理下基因的表达情况，结果表明，MdCBFL1基因对低温、干旱、盐胁迫3种逆境胁迫均有一定程度的响应，MdCBFL2~MdCBFL4基因受低温与高盐的诱导。为进一步阐明苹果MdCBF基因在逆境应答中的功能、机制提供了有益线索。

关键词：苹果,CBF/DREB转录因子,基因克隆,非生物胁迫,表达分析,

基金资助：国家自然科学基金项目（31660433）；新疆农业大学大学生创新项目