水稻肽链释放因子OseRF1-3基因克隆、表达及启动子分析

来源：华北农学报杂志2018年第1期北京时间：

作者：唐跃辉, 包欣欣, 刘坤, 张慧聪, 王双, 赵君苇, 娄慧敏, 王箐, 梁静, 乔蓉, 李成伟

单位：1. 周口师范学院 植物遗传与分子育种重点实验室, 河南 周口 466000;；2. 河南省作物分子育种与生物反应器重点实验室, 河南 周口 466000

摘要：为了揭示水稻中肽链释放因子eRF1在蛋白质生物合成中的作用，对水稻eRF1基因的全长cDNA和启动子进行了克隆与表达模式分析。通过RT-PCR技术克隆获得1个水稻eRF1基因，命名为OseRF1-3，序列分析表明，该基因CDS序列全长1 308 bp，编码436个氨基酸，包含N、M、C共3个保守结构域。qRT-PCR结果表明，OseRF1-3是组成型表达，在水稻穗中表达最高。以水稻叶片基因组DNA为模板，通过PCR技术克隆了该基因起始密码子上游2 120 bp启动子序列，构建该基因启动子融合GUS植物表达载体，并通过农杆菌介导法导入水稻愈伤组织。GUS组织化学染色分析表明，OseRF1-3基因启动子驱动GUS基因在水稻各组织部位都表达即组成型表达，在根中表达较弱，在水稻花、硬壳中检测到GUS基因较强表达。GUS检测OseRF1-3基因启动子驱动GUS表达的结果与qRT-PCR得出的结果相一致。因此，该研究将为进一步探索OseRF1-3基因的功能奠定理论基础。

关键词：水稻,肽链释放因子,启动子,表达模式,GUS,

基金资助：2018年度河南省高等学校重点科研项目（18A180035）；河南省科技开放合作项目（132106000077）；河南省科学技术厅科技攻关项目（152102410074）；周口师范学院青年基金（ZKNUB3201801）；高层次人才基金（ZKNUC2016030）