海藻糖-6-磷酸合成酶基因的序列优化与表达研究

来源：华北农学报杂志2018年第2期北京时间：

作者：何道文, 刘小红, 赵欢, 张咏祀

单位：1. 西华师范大学, 西南野生动植物资源保护教育部重点实验室, 四川 南充 637002;；2. 西华师范大学 生命科学学院, 四川 南充 637002

摘要：为了获得一个优良的玉米抗旱育种基因资源，借助于生物信息学手段和分子生物学实验操作技术，从木棉植物中获得了一个编码海藻糖-6-磷酸合成酶的抗旱基因序列。根据玉米对密码子使用的偏爱性，合成了1个可用于玉米转化并提高其耐旱性的新的海藻糖-6-磷酸合成酶基因，进一步通过DNA分子的酶切和连接等操作将该基因构建成表达质粒，再导入大肠杆菌和酵母细胞以鉴定其是否能在原核和真核细胞中表达。最后该基因被构建到植物表达载体上，并转入农杆菌细胞。结果表明，新合成基因全长为2 586 bp，包含完整的开放阅读框，编码861个氨基酸；构建出的原核和真核表达质粒与预期的结果相符，该基因可用于细胞转化试验；该新合成基因能在大肠杆菌和酵母细胞中有效表达出海藻糖-6-磷酸合成酶；该基因被成功构建到植物表达载体pCAMBIA-2300上，并转入了农杆菌细胞LBA4404工程菌株。综合上述结果认为，获得了1个新的海藻糖-6-磷酸合成酶基因，该基因能在原核和真核细胞中有效表达出海藻糖-6-磷酸合成酶，构建的植物基因表达质粒可以直接用于玉米抗旱转基因育种。

关键词：玉米,海藻糖-6-磷酸合成酶,基因,抗旱,

基金资助：四川省教育厅应用基础重点项目（13ZA0012）；西华师范大学英才基金项目（17YC338）