水稻OsAMTR310基因的克隆与在干旱胁迫下的功能分析

来源：华北农学报杂志2018年第3期北京时间：

作者：李嘉明, 孙健, 张明辉, 冷月, 孙琦, 赵宏伟, 邹德堂

单位：1. 东北农业大学 农学院, 黑龙江 哈尔滨 150030;；2. 东北农业大学 生命科学学院, 黑龙江 哈尔滨 150030

摘要：为了探究水稻转氨酶基因OsAMTR310的功能以及明确其作用机制，利用多种分子生物学手段对OsAMTR310基因进行了功能分析。实时定量PCR的分析结果表明，OsAMTR310在干旱条件下相对基因表达水平是正常条件下的3.0倍；根据NCBI上获得的OsAMTR310基因序列设计引物，扩增其全长CDS序列，并利用NCBI对蛋白序列的功能结构域进行预测；将OsAMTR310的CDS序列连入pCAMBIA1302中构建超表达载体，并转入受体材料，通过PCR及蛋白质免疫印迹分析来确定OsAMTR310阳性转基因植株，进而分析OsAMTR310转基因植株与野生型植株在干旱胁迫下的差异来验证OsAMTR310基因的功能。结果表明，OsAMTR310 cDNA全长1 873 bp，CDS全长1 533 bp，编码510个氨基酸。OsAMTR310蛋白具有3个保守的结构域，属于乙酰鸟氨酸氨基转移酶家族。在正常条件下，OsAMTR310转基因植株与野生型相比没有明显的差别；然而，在干旱条件下，OsAMTR310转基因植株的存活率是野生型的1.5~2.0倍。通过测定叶片游离脯氨酸含量发现，OsAMTR310转基因植株游离的脯氨酸含量在正常条件下与野生型相比并无显著差异，而OsAMTR310转基因植株的游离脯氨酸含量在干旱条件下是野生型植株的1.5~2.0倍，说明水稻转氨酶基因OsAMTR310赋予了水稻更高的耐旱性。

关键词：水稻,<em>OsAMTR310</em>基因,转基因,转氨酶,耐旱性,

基金资助：黑龙江省自然科学基金项目（面上项目C2015003）