《华北农学报杂志》发表论文赏析

蓝光受体基因Cmwc-1和Cmwc-2的原核表达和蛹虫草中表达蛋白的检测

来源:华北农学报杂志2018年第4期北京时间:

作者:钟雪晴, 叶德晓, 毛玉梅, 付鸣佳, 杨志海

单位:江西师范大学 生命科学学院, 江西 南昌 330022

摘要:生物体中接受蓝光信号的因子为蓝光受体蛋白。为了揭示蓝光受体蛋白在蛹虫草中的存在形式,将蛹虫草蓝光受体基因Cmwc-1和Cmwc-2的部分序列构建在原核表达载体pET-41a (+)中,在大肠杆菌中进行表达。以所表达的融合蛋白作抗原制备抗体,并由Western Blotting对蛹虫草菌丝体和子实体分别进行分析检测。结果表明,获得了高效价的蛹虫草蓝光受体蛋白CmWC-1和CmWC-2的抗体。经过Western Blotting分析,在蛹虫草菌丝体和子实体中检测到CmWC-1有42 ku (CmWC1-42)和48 ku (CmWC1-48)2种蛋白质存在形式,其中在菌丝体中主要以CmWC1-48为主,CmWC1-42的相对量较少;而在子实体中主要以CmWC1-42为主,没有检测到CmWC1-48。在菌丝体和子实体中检测到CmWC-2有相同的50 ku (CmWC2-50)蛋白质存在形式。结果表明,在CmWC-1和CmWC-2复合物行使生物功能过程中,CmWC-1在菌丝体和子实体中分别产生了差异性降解,而CmWC-2维持稳定。

关键词:蛹虫草,蓝光受体蛋白,抗体制备,Western Blotting分析,

基金资助:国家自然科学基金项目(31760601;31260010);江西省重点研发计划项目(20171BBF60007)

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