水杨酸诱导黄瓜PCD的鉴定及相关基因的表达分析

来源：华北农学报杂志2018年第6期北京时间：

作者：陈冲, 刘双, 王丹丹, 池春玉, 朱宏, 金晓霞, 丁国华

单位：1. 哈尔滨师范大学 生命科学与技术学院, 黑龙江 哈尔滨 150025;；2. 植物生物学黑龙江省高校重点实验室, 黑龙江 哈尔滨 150025

摘要：为揭示叶绿体在水杨酸（SA）诱导黄瓜PCD过程中的作用，选择黄瓜幼苗四叶期时，叶片滴加10 mmol/L SA，在滴加SA的位置取材，首先进行ROS原位检测、Trypan blue染色、PI和FDA染色、TUNEL检测，验证SA可诱导黄瓜PCD过程；继而根据高通量测序结果，从1 759个高通量测序得到的差异表达基因中，筛选出15个注释含chloroplast的基因，RT-PCR验证这些基因在SA诱导的黄瓜叶片PCD中有表达，初步认定这些基因参与了SA诱导的黄瓜P CD过程。对筛选得到的基因进行qRT-PCR表达分析，这15个基因在SA诱导的黄瓜PCD中起正调控或负调控的作用，上调表达的5个基因分别是：类囊体加工肽酶1基因、6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因、果糖1，6-二磷酸醛缩酶3基因、α-葡聚糖-水二激酶1基因和丙二烯氧化物环化酶4基因；下调表达的10个基因分别是：甜菜碱脱氢酶1基因、钙敏感受体基因、脱镁叶绿酸a单加氧酶基因、叶绿素b还原酶1基因、σ因子结合蛋白1基因、NADPH-原叶绿酸酯还原酶基因、2-琥珀苯甲酸-辅酶A连接酶基因、ATP依赖的锌金属蛋白酶基因、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸转运子基因和胱硫醚β合成酶（CBS）蛋白基因。为进一步揭示叶绿体在SA诱导黄瓜PCD中的作用奠定了基础。

关键词：黄瓜,水杨酸,细胞程序性死亡,基因表达,

基金资助：国家自然科学基金项目（31770350）；植物生物学黑龙江省高校重点实验室（哈尔滨师范大学）开放课题（ZK201201）