金线莲C4H基因克隆与表达及在黄酮合成途径中的作用

来源：华北农学报杂志2024年第S1期北京时间：

作者：林宏峻, 吕珂, 潘萍萍, 董莉莉, 徐志浩, 王忠华

单位：浙江万里学院 生物技术研究所,浙江 宁波 315100

摘要：为探究肉桂酸-4-羟化酶(C4H)对金线莲类黄酮含量积累的影响,以金线莲为研究对象,利用硝酸铝显法测定其不同组织的总黄酮含量;基于同源克隆技术和RACE技术从金线莲分离克隆出C4H基因(ArC4H,GenBank登录号ON455229);利用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)分析金线莲不同组织C4H基因表达量。结果表明,金线莲不同组织黄酮类物质含量有显著差异(叶>茎>根),其中叶片的总黄酮含量是根和茎的3倍多;系统进化树分析,发现金线莲与大多数兰科植物的亲缘关系比较接近,ArC4H基因的开放阅读框为1 518 bp,编码505个氨基酸,属于细胞色素P450超家族成员之一,理论分子量为65.17 ku,等电点为9.21,属于亲水蛋白;ArFLS具有序列保守性,在不同组织中均有表达,qRT-PCR分析表明,该基因在茎中表达量最高,根中次之,在叶中表达量极低,且总黄酮含量也有相似的趋势。据此初步确定,该基因为金线莲ArC4H基因。

关键词：金线莲,<i>C4H</i>基因,基因克隆,表达分析,黄酮,

基金资助：浙江省中药材新品种选育重大科技专项(2021C02074-1); 浙江省一流学科学生创新项目(CX2022014)