太平洋鳕神经坏死病毒衣壳蛋白（CP）的原核表达及条件优化

来源：大连海洋大学学报杂志2016年第2期北京时间：

作者：毛明光, 温施慧, 姜志强, 蒋洁兰, 孙航, 吕绘倩, 李幸

单位：大连海洋大学农业部北方海水增养殖重点实验室，辽宁省北方鱼类应用生物学与增养殖重点实验室，辽宁大连116023

摘要：为深入研究太平洋鳕Gadusmacrocephalus神经坏死病毒 （Pacific cod nervous necrosis virus，PCNNV）衣壳蛋白 （capsid protein，CP）的功能，将PCNNV cp基因连接到pET-32a原核表达载体中，构建原核表达重组载体pEVCP，将其转化至大肠杆菌E.coli BL21（DE3）表达系统中进行融合表达，对诱导剂 IPTG浓度、诱导时间和温度等诱导表达条件进行优化，采用SDS-PAGE及质谱技术鉴定表达产物。结果表明：本研究中成功构建了重组载体pEVCP，表达的目的蛋白相对分子质量约为55 000；目的蛋白经质谱鉴定，有6个肽段的氨基酸序列与预期一致；对重组菌株pEVCP/BL21的最佳诱导条件为IPTG浓度0.1 mmol/L、最佳诱导时间3 h、温度30℃。本研究结果可为后续冷水鱼类病毒疫苗的研制及病毒快速检测试剂盒的研发奠定基础。

关键词：太平洋鳕,神经坏死病毒,衣壳蛋白,原核表达