冷休克诱导红鳍东方鲀雄核发育单倍体的条件优化

来源：大连海洋大学学报杂志2017年第3期北京时间：

作者：周贺, 张蕊, 徐其征, 麻天宇, 江振华, 庄子昕, 高俊, 姜志强, 李雅娟

单位：大连海洋大学 辽宁省省级高校海洋生物资源可持续利用重点实验室, 农业部北方海水增养殖重点实验室, 辽宁 大连

摘要：为探索无需卵子失活仅用冷休克方法诱导雄核发育单倍体,以红鳍东方鲀Takifugu rubripes为研究对象,试验选用L9(34)设计,进行3因素3水平的正交试验,处理温度设为0、2、4益,处理持续时间设为30、45、60 min,处理起始时间设为2、5、8 min,共9个试验组,并对其后代采用单个胚胎染色体计数法进行染色体数目统计及微卫星分析。结果表明:冷休克诱导得到的单倍体率最高为第7试验组和第9试验组,分别为受精后8 min在4益下处理30 min和受精后5 min在4益下处理60 min,单倍体率分别为86.7%和80.0%;根据正交试验直观分析结果,得出冷休克诱导红鳍东方鲀雄核发育单倍体的3因素最优组合为处理温度4益、处理持续时间60 min、处理起始时间8min;影响冷休克诱导单倍体的3因素主次顺序为处理温度>处理起始时间>处理持续时间;微卫星分析结果表明,单倍体携带的遗传基因全部为父本的遗传基因。研究表明,仅用冷休克方法可以成功诱导红鳍东方鲀雄核发育单倍体,雄核发育单倍体率高达86.7%,为进一步研究诱导红鳍东方鲀雄核发育二倍体奠定了基础。

关键词：红鳍东方鲀,冷休克,雄核发育,单倍体,正交试验

基金资助：国家自然科学基金资助项目(41606178);辽宁省博士科研启动基金资助项目(201501185);辽宁省教育厅重点实验室基础研究项目(LZ2015010)