巴西龟眼炎病原菌的分离鉴定及组织病理学研究

来源：大连海洋大学学报杂志2018年第5期北京时间：

作者：叶明皓, 胡秀彩, 吕爱军, 孙敬锋, 刘小雪, 宋亚娇

单位：天津农学院 水产学院,天津市水产生态及养殖重点实验室，天津 河南师范大学 水产学院，河南 新乡

摘要：为防治龟类细菌性眼炎病，从患眼炎巴西龟Trachemysscriptaelegans(体质量约150.0 g)眼内分泌液中分离获得1株革兰氏阴性细菌，编号为G0503菌株，通过细菌形态学观察、理化特性、16S rDNA克隆和测序，以及构建系统发育进化树分析等方法，对其进行了鉴定研究。结果表明：该分离菌与甘露糖、半乳糖、肌醇等反应为阳性，与赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶等反应为阴性；进一步采用PCR方法扩增其16S rDNA序列，将其亚克隆至pMD18-T载体中测序，获得片段大小为1500 bp，与模式菌株ProvidenciarettgeriDSM 4542(AM040492.1)序列一致性为99.30%；构建系统发育树分析显示，该菌与Providenciarettgeri(JN644501.1)自然聚为一支，最终判定G0503菌株为雷氏普罗威登斯菌Providenciarettgeri；药敏试验结果显示，该菌株对头孢哌酮、头孢噻肟、诺氟沙星、左氟沙星、氟苯尼考等药物敏感，对阿莫西林、氨苄西林、磺胺异恶唑、复方新诺明等耐药；用该分离菌人工回归感染巴西龟死亡率达40%，主要呈现眼睛肿大、黏液增多，停止摄食等特征，并且与自然发病龟临床症状一致；组织病理学观察显示，病龟出现眼睑上皮细胞减少、淋巴细胞浸润等病理变化。本研究中首次报道巴西龟眼炎病原的分离鉴定，对该病防治可提供一定的参考依据。

关键词：巴西龟,雷氏普罗威登斯菌,16SrDNA,药敏试验,组织病理