鮰爱德华菌T6SS eivpP基因缺失突变株的构建

来源：大连海洋大学学报杂志2019年第1期北京时间：

作者：郭羿, 杨晓宇, 倪萍, 王一婷, 郭思聪, 马红丽, 赵小然, 叶仕根

单位：大连海洋大学 农业农村部北方海水增养殖重点实验室，大连市海珍品疾病防控重点实验室，辽宁 大连

摘要：为研究鮰爱德华菌EdwardsiellaictaluriⅥ型分泌系统(T6SS)EivpP与其他分泌蛋白之间的相互作用及其在细菌致病过程中的作用机制，在克隆到eivpP基因上、下游同源臂的基础上，采用融合PCR技术制备了eivpP基因缺失用的融合片段，并成功克隆到自杀质粒pDM4内,再将重组自杀质粒转化到大肠杆菌S17-1(pir)中，与鮰爱德华菌野生菌株ATCC33202共培养。经同源重组和蔗糖负筛获得鮰爱德华菌eivpP基因缺失突变阳性克隆，经PCR鉴定结果显示，突变株未检测出eivpP基因，即eivpP基因彻底敲除成功。本试验结果可为研究eivpP基因在鮰爱德华菌致病过程中的作用机制提供数据资料，为鮰爱德华菌弱毒疫苗的研发提供理论依据。

关键词：鮰爱德华菌,eivpP基因,基因敲除,缺失突变