龟源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及药敏特性研究

来源：大连海洋大学学报杂志2019年第6期北京时间：

作者：白杰, 周美红, 胡秀彩, 吕爱军, 叶明皓, 孙敬锋

单位：天津农学院 水产学院，天津市水产生态及养殖重点实验室，天津 300384

摘要：为探明患病巴西龟Trachemysscriptaelegans的病原及其生物学特征，从病龟体内分离获得1株革兰氏阴性细菌，编号为TC-1，采用PCR方法扩增16S rDNA、gyrB基因序列，将其亚克隆到pMD18-T载体中测序获得片段大小分别为1503 bp、989 bp，与GenBank中模式菌株弗氏柠檬酸杆菌Citrobacterfreundii序列相似性分别为99.60%、98.80%；系统进化树分析显示，分离菌株与C.freundii自然聚为一支，最终鉴定分离菌株TC-1为弗氏柠檬酸杆菌；药敏试验显示，TC-1菌株对头孢哌酮、头孢他啶、萘啶酸、诺氟沙星、左氟沙星、四环素、氟苯尼考和亚胺培南等药物敏感，对阿莫西林、头孢氨苄、磺胺异恶唑和复方新诺明等耐药；人工回归感染试验显示，TC-1菌株对巴西龟有致病性，并与自然发病龟的临床症状基本一致。本研究结果可为龟类弗氏柠檬酸杆菌的分子诊断及防治提供参考依据。

关键词：巴西龟,弗氏柠檬酸杆菌,16SrDNA,gyrB基因,药敏试验

基金资助：国家大学生创新训练计划项目(201810061036)；天津市自然科学基金资助项目(18JCYBJC29900, 16JCZDJC33500)；天津市水产产业技术体系创新团队项目(ITTFRS2017009)；天津农学院综投平台项目(J01009030638)；天津市水产生态及养殖重点实验室开放基金资助项目(TJAE201803)；天津市教委科研计划重点项目(2019ZD14)