三疣梭子蟹C-型凝集素CTL5基因的克隆及在病原刺激下的免疫应答

来源：大连海洋大学学报杂志2020年第2期北京时间：

作者：阎德平、, 吕建建、, 题兴斌, 张文、, 张云滨, 宋柳, 刘萍、

单位：1.大连海洋大学 水产与生命学院,辽宁 大连；2.青岛海洋科学与技术国家实验室 海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室,山东 青岛；3.中国水产科学研究院黄海水产研究所 农业农村部海洋渔业可持续发展重点实验室,山东 青岛

摘要：为明确三疣梭子蟹PortunustrituberculatusC-型凝集素CTL5的结构和功能，采用cDNA末端快速扩增(Rapid amplification of cDNA end，RACE)技术克隆获得三疣梭子蟹C-型凝集素CTL5基因(PtCTL5)的cDNA全长。结果表明：PtCTL5基因全长为1026 bp，包含732 bp的开放阅读框，编码了243个氨基酸组成的蛋白，相对分子质量为26 000，为半乳糖结合型凝集素；Blast分析显示，PtCTL5氨基酸序列与克氏原螯虾ProcambarusclarkiaCTL的一致性最高，为41.84%；系统进化树分析显示，PtCTL5与已发表的三疣梭子蟹的另4种C-型凝集素亲缘关系较远；胚胎及幼体不同发育时期的定量分析表明，PtCTL5在溞状幼体Ⅲ期表达量最高，在胚胎发育的心跳期表达量最低；组织表达分析显示，PtCTL5在血细胞中的表达量最高，肝胰腺中次之；人工注射副溶血弧菌Vibrioparahemolyticus后，PtCTL5在血细胞和肝胰腺中的表达量均于72 h时达到峰值；而注射对虾白斑综合征病毒(WSSV)感染后，PtCTL5在血细胞和肝胰腺中的表达量分别于72、12 h达到峰值且显著高于对照组(P<0.05)。研究表明，C-型凝集素在三疣梭子蟹先天免疫中具有一定的功能，本研究结果可为进一步解析三疣梭子蟹免疫应答机制提供参考。

关键词：三疣梭子蟹,C-型凝集素,副溶血弧菌,对虾白斑综合征病毒(WSSV),免疫应答

基金资助：国家自然科学基金资助项目(41576147)；泰山领军人才工程高效生态农业创新类计划项目(LJNY2015002)；国家虾蟹产业技术体系专项(CARS-48)；江苏省重点研发计划项目(BE2017325)；青岛市应用基础研究计划项目(17-1-1-95-jch)；中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(20603022018027)