刺参多功能表皮生长因子6 (megf6) cDNA克隆及在肠再生过程中的表达分析

来源：大连海洋大学学报杂志2020年第2期北京时间：

作者：陈雷、, 姚锋, 唐爽, 郭良勇, 王珊, 方蕾, 秦玉雪, 尹增强, 侯林

单位：1.辽宁师范大学 生命科学学院，辽宁 大连；2.大连海洋大学 海洋科技与环境学院，辽宁 大连；3.辽宁省渔港与水产种苗中心，辽宁 大连

摘要：为了探究刺参Apostichopusjaponicus多功能表皮生长因子6(multiple epidermal growth factor 6)的生物学信息和功能，利用 RACE技术克隆了体质量为(92.0±4.0)g的成体刺参megf6基因(Aj-megf6)cDNA全长序列，并分析了该基因的信息学特征及其在肠再生过程中表达水平的变化。结果表明：刺参megf6基因的cDNA序列全长为5665 bp，共编码了1604个氨基酸，具有37个EGF样结构域；该基因编码蛋白的相对分子质量为172 500，理论等电点为4.74，该蛋白具有信号肽，为分泌蛋白，属于亲水性、非跨膜蛋白，共有53个磷酸化位点，分别为23个Ser位点、12个Thr位点、18个Tyr位点；MEGF6氨基酸多序列比对发现，刺参MEGF6与其他物种的氨基酸序列一致性为38.59%～49.07%，其中与紫球海胆Strongylocentrotuspurpuratus的一致性最高，为49.07%，其次为长棘海星Acanthasterplanci(48.71%)；基于MEGF6氨基酸序列的系统进化树分析显示，刺参与紫球海胆、长棘海星聚为一支，该结果符合刺参的分类和进化地位，MEGF家族成员间比对分析显示，MEGF家族成员间具有一定的分化；实时定量PCR(qPCR)结果显示，在刺参肠再生过程中megf6 mRNA表达量呈先升高后降低的趋势，其中再生6 d时的表达量达到峰值，为对照组的126.47倍，再生18 d时降至正常水平。研究表明，刺参megf6基因的表达与刺参肠管形态的变化趋势相一致，推断megf6可能在刺参肠再生过程中发挥重要作用。

关键词：刺参,多功能表皮生长因子6基因(megf6),克隆,再生,表达

基金资助：辽宁省教育厅产业技术研究院项目(DL201904)；辽宁省教育厅科学研究项目(QL201706)