卵胎生许氏平鲉Sox9基因的克隆、启动子分析、表达及其细胞定位研究

来源：大连海洋大学学报杂志2020年第5期北京时间：

作者：马丽曼, 张全启, 齐洁, 卢梦萱, 王文基

单位：1.台州学院 医学院，浙江 台州 318000； 2.中国海洋大学 生命科学学院，山东 青岛 266003； 3.台州学院 生命科学学院，浙江 台州 318000

摘要：为研究卵胎生许氏平鲉Sebastesschlegeli性腺分化及性别决定分子机制，采用同源克隆和RACE技术从许氏平鲉(体质量758 g±15 g)性腺组织中获得了许氏平鲉Sox9基因全长cDNA,运用生物学软件对Sox9启动子转录因子结合位点进行预测,并利用实时定量PCR和原位杂交对Sox9基因的表达进行了研究。结果表明：许氏平鲉Sox9基因cDNA全长2039 bp，包括1461 bp的ORF，336 bp的5′UTR 和242 bp的3′UTR,其编码产物(486 aa)含有高度保守的HMG结构域；许氏平鲉Sox9基因启动子区存在多个转录因子结合位点，包括AP-1、GATA-3、Oct-1、FOXD3，以及性别相关SRY、Sox5、Sox9等蛋白结合位点；实时定量PCR显示，许氏平鲉Sox9基因在仔鱼发育阶段(出生后1～35日龄)均有表达，在性腺分化的敏感时期(25日龄)表达量达到较高水平；在成体性腺中显示了性别两相性差异，即在精巢中的表达高于卵巢；原位杂交显示，许氏平鲉Sox9基因在精巢的生殖细胞、Sertoli细胞，以及卵巢的卵母细胞和滤泡细胞中均有表达。研究表明，Sox9基因在许氏平鲉性腺分化及性腺发育过程中可能发挥重要作用。

关键词：许氏平鲉,启动子分析,性腺分化,性别决定,Sox9基因

基金资助：浙江省科技计划项目(2017C37154)；台州市科技计划项目(15ny11)