一株黄金鲫鱼源蜡状芽孢杆菌的筛选、鉴定及耐性研究

来源：大连海洋大学学报杂志2020年第6期北京时间：

作者：吴振超, 陈玉珂, 高永生, 王森, 雷新雨, 于梦楠, 张宇柔, 张东鸣

单位：1.吉林农业大学 生命科学学院， 吉林 长春 130118；2.吉林农业大学 动物科学技术学院，动物生产及产品质量安全教育部重点实验室，吉林省动物营养与饲料科学重点研究室，吉林 长春 130118； 3.通化师范学院，吉林 通化 134000

摘要：为筛选出适合制作水产微生态制剂的黄金鲫Carassiusauratus鱼源益生菌，从黄金鲫肠道分离细菌，通过产酶能力测试、体外抑菌试验和抗生素敏感性试验进行筛选，筛选菌株经纯化培养后通过形态特征观察、生理生化及分子特征进行鉴定；采用紫外分光光度计和稀释涂布平板计数相结合的方法，建立细菌活菌数与OD值的线性曲线，测定细菌对高温、酸性、胃液、肠液、胆盐耐受能力；通过固定黄金鲫体外肠道黏液蛋白模型，结合荧光标记物Hoechst 3325标记细菌法，检测细菌对黄金鲫肠黏液蛋白的黏附能力，并通过急性毒性试验检测菌株的安全性。结果表明：从黄金鲫肠道中共分离出5株具有产酶能力的细菌，其中HJJ-1菌株具备较好的产酶特性，可有效抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的生长，且对多种药物敏感；进一步对该菌株进行鉴定及益生效果评价，16S rRNA基因序列分析显示，HJJ-1株与蜡状芽孢杆菌Bacilluscereus的一致性达100%，结合形态观察和生理生化试验结果，最终鉴定HJJ-1菌株为蜡状芽孢杆菌；菌株OD600 nm值(x)与活菌数(y)的回归方程式为y=5.493 3e7.823 8x(R2=0.990 2)，该菌株具有良好的耐高温、耐酸性、耐胃液、耐肠液、耐胆盐等特点，可黏附于黄金鲫肠道黏液蛋白，且安全性良好。研究表明，本试验中最终筛选出的黄金鲫鱼源蜡状芽孢杆菌性能优良且安全，具有潜在的益生特性。

关键词：黄金鲫,蜡状芽孢杆菌,分离鉴定,益生特性

基金资助：吉林省科技厅重点研发科研项目(20180201017NY)；吉林省教育厅科研项目(JJKH20180698KJ)