尼罗罗非鱼TIRAP基因克隆、组织表达及其在无乳链球菌、脂多糖和聚肌胞苷酸刺激下的免疫应答

来源：大连海洋大学学报杂志2020年第6期北京时间：

作者：刘洁、, 高风英, 卢迈新, 陈刚, 曹建萌, 刘志刚, 王淼, 韩雪晴、

单位：1.中国水产科学研究院珠江水产研究所 农业农村部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室， 广东 广州 510380； 2.广东海洋大学 水产学院，广东 湛江 524025； 3.上海海洋大学 水产与生命学院，上海 201306

摘要：为研究包含TIR结构域的接头蛋白(TIR domain-containing adaptor protein,TIRAP)基因在TLR信号介导的先天免疫中的调控作用，通过反转录-聚合酶链式反应和分段扩增获得了尼罗罗非鱼OreochromisniloticusTIRAP基因的cDNA全长，并对其生物信息学进行分析，利用RT-qPCR法分析TIRAP在健康鱼各组织中的表达情况，以及在无乳链球菌Streptococcusagalactiae、脂多糖(LPS)和聚肌胞苷酸(Poly I:C)刺激后不同组织不同时间点的表达量变化。结果表明：TIRAPcDNA全长2 900 bp，开放阅读框为816 bp，可编码291个氨基酸；系统进化分析显示，尼罗罗非鱼与快乐东方鲷AstatotilapiacallipteraTIRAP的亲缘关系较近；TIRAP在尼罗罗非鱼11个组织(肝、皮肤、心脏、肾、胃、鳃、脑、脾、肠、血液和肌肉)中均有表达，其中肌肉中表达量最高(P<0.05)，胃中表达量相对较低；人工感染无乳链球菌引起TIRAP基因在肠和肾中上调表达，均在注射后1 d时表达量达到最大值；LPS和Poly I:C刺激引起TIRAP基因在肝、脾和肾中上调表达，但在肠中表达量均低于对照组(0 h)。研究表明，无乳链球菌、LPS和Poly I:C均能诱导TIRAP基因表达，TIRAP基因参与了尼罗罗非鱼免疫应答反应，暗示TIRAP在先天免疫中发挥作用。

关键词：尼罗罗非鱼,包含TIR结构域的接头蛋白(TIRAP),克隆,mRNA表达分析

基金资助：国家重点研发计划项目(2018YFD0900302)；现代农业产业技术体系专项(CARS-46)