菲律宾蛤仔硒依赖性谷胱甘肽过氧化物酶基因克隆、表达及其对脂多糖和肽聚糖的刺激响应

来源：大连海洋大学学报杂志2021年第1期北京时间：

作者：王珺, 梁腾, 王化敏, 闫喜武, 丁鉴锋,

单位：1.大连海洋大学 水产与生命学院，辽宁 大连 116023； 2.辽宁省贝类良种繁育工程技术研究中心，辽宁 大连 116023

摘要：为探究菲律宾蛤仔Ruditapesphilippinarum硒依赖性谷胱甘肽过氧化物酶(Se-GPx)基因的序列特征、组织表达模式及其在不同壳色蛤仔免疫应答中的作用，利用RACE方法获得分析菲律宾蛤仔两个Se-GPx基因(Se-GPx-a和Se-GPx-b)全长序列，采用RT-qRCR方法分析基因表达规律。结果表明:RpSe-GPx-a和RpSe-GPx-b基因开放阅读框(ORF)长度分别为582 bp和633 bp，分别编码193和210个氨基酸，在3′非翻译区(UTR)均含有保守硒代半胱氨酸插入序列(SECIS)元件；氨基酸序列分析发现，RpSe-GPx-a和RpSe-GPx-b序列中含有与酶结构和功能至关重要的特征，包括终止密码子UGA编码的硒代半胱氨酸，GPx标签序列(GKVVLVENVASLUGTT)和活性位点序列(WNFEKF)均高度保守；系统进化分析发现,RpSe-GPx与其他软体动物物种具有较近的亲缘关系；组织表达分析发现，RpSe-GPx在肝胰腺中表达量最高(P<0.05)，在外套膜、鳃组织中表达量次之，在闭壳肌中表达量最低(P<0.05)；用脂多糖(LPS)和肽聚糖(PGN)分别注射3种壳色蛤仔(白蛤、白斑马、橙蛤)，LPS刺激后，白蛤Se-GPx-a和Se-GPx-b基因表达量分别在12、6 h时达到最大值(P<0.05)，白斑马蛤Se-GPx-a和Se-GPx-b基因表达量分别在48、6 h时达到最大值(P<0.05)，橙蛤Se-GPx-a和Se-GPx-b基因表达量分别在3、24 h时达到最大值(P<0.05)；PGN刺激后，白蛤、白斑马蛤和橙蛤Se-GPx-a和Se-GPx-b基因表达量分别在24、24、48 h时达到最大值(P<0.05)。研究表明，3种壳色蛤仔黑色素形成过程的差异可能是导致其GPx基因对LPS和PGN刺激表现出不同响应的重要原因之一。

关键词：菲律宾蛤仔,Se-GPx,克隆,基因表达

基金资助：国家重点研发计划项目(2018YFD0901404)