大菱鲆源副乳房链球菌的分离鉴定及其毒力基因型

来源：大连海洋大学学报杂志2021年第4期北京时间：

作者：王鹤, 李战军, 黄华, 徐晓莹, 贺加贝, 曹亚男, 赵强

单位：1.烟台市海洋经济研究院，山东 烟台 264006；2.山东省渔业发展和资源养护总站，山东 烟台 264003

摘要：为研究2019年山东省烟台市某大菱鲆Scophthalmusmaximus养殖场出现的以突眼、腹水、红肿为主要特征的疾病发病原因，用平板划线法从患病濒死大菱鲆(体质量为195～535 g)肝、肾、脾、心等组织中分离获得1株优势菌，采用形态学观察、16S rRNA序列分析、PCR特异性扩增和人工回归感染试验等方法对优势菌进行鉴定，检测其血清型、毒力基因携带情况，并用纸片扩散法(K-B)检测分离株对23种抗生素的敏感性。结果表明：从病鱼分离获得的菌株为γ溶血的革兰氏阳性球菌，生理生化特征为能水解七叶苷，不能水解精氨酸、赖氨酸等，能利用蔗糖、甘露醇、葡萄糖产酸，不能利用枸橼酸、鼠李糖、尿素等；经16S rRNA序列比对、链球菌特异性引物扩增等鉴定其为副乳房链球菌Streptococcusparauberis；该菌株的毒力基因型为scpB--bca--bac--lmb--fbsA--cfb--cpsD--pavA--bibA+-sip+-cylE--hylB+；将分离菌株制备成6.3×107、6.3×108、6.3×109、6.3×1010CFU/mL 4个浓度，腹腔注射健康大菱鲆，得到菌株对受试鱼的半致死浓度(LD50)为6.9×108CFU/mL；药敏试验显示，该菌株对β-内酰胺类、喹诺酮类、四环素类、大环内酯类、多肽类、利福霉素类等6类14种抗生素类药物敏感，对氨基糖苷类、磺胺类及呋喃类等3类6种抗生素耐药，对诺氟沙星、强力霉素、多粘菌素B中度敏感。本研究中首次报道了中国鱼源副乳房链球菌自然感染发病，可为鱼源副乳房链球菌分子特性研究、致病机理、药物防治等提供科学参考。

关键词：大菱鲆,副乳房链球菌,分离鉴定,药敏试验,毒力基因

基金资助：烟台市重点研发计划项目(2019MSGY127)；山东省现代农业产业技术体系鱼类创新团队(SDAIT-12-10)