基于响应面法的维氏气单胞菌灭活疫苗菌液发酵工艺优化及免疫效力比较

来源：大连海洋大学学报杂志2021年第4期北京时间：

作者：孙承文, 赖迎迢, 巩华, 任燕, 江小燕, 陈总会, 黄志斌, 陶家发

单位：1.中国水产科学研究院 珠江水产研究所，广东 广州 510380；2.农业农村部渔药创制重点实验室，广东省水产动物免疫技术重点实验室，广东 广州 510380

摘要：为优化维氏气单胞菌Aeromonasveronii灭活疫苗菌液发酵工艺，通过单因素试验确定温度、培养基初始pH、转速、接种量对菌液活菌数的影响，应用响应面法的Box-Behnken 进行优化，对不同发酵条件下发酵菌液制备灭活疫苗的安全性及免疫效力进行了比较。结果表明：当最优发酵条件为温度28 ℃、培养基初始pH 7.5、摇床转速230 r/min、接种量5%时，维氏气单胞菌CA07株发酵获得最大的活菌数为11.13×109CFU/mL，较单因素试验确定的最高活菌数值提高20.59%，与预测值基本相符；优化发酵条件能提升发酵菌液活菌数，从而显著提高制备的灭活疫苗的相对免疫保护率，即使制备的灭活疫苗稀释3 倍，免疫鲫鱼Carassiusauratus的相对保护率仍可达到70%以上，以维氏气单胞菌LY02株攻毒，相对免疫保护率达40%以上。研究表明，通过响应面法优化维氏气单胞菌灭活疫苗发酵工艺，在显著增加菌液产量的同时可提高疫苗的免疫效力。

关键词：维氏气单胞菌,发酵工艺条件,优化,响应面分析,免疫效力

基金资助：中国水产科学研究院基本科研业务费项目(2020XT0405)；广州市科技计划项目(201904020004)；国家重点研发计划“蓝色粮仓科技创新”项目(2019YFD0900103)