马氏珠母贝Nrf 2基因的克隆及其在不同免疫刺激和营养条件下的表达变化

来源：大连海洋大学学报杂志2022年第2期北京时间：

作者：蔡彩霞, 廖永山, 杨创业, 郑哲, 邓岳文, 王庆恒

单位：1.广东海洋大学 水产学院，广东 湛江 524088；2.广东省珍珠养殖与加工工程技术研究中心，广东 湛江 524088；3.广东省海水养殖生物育种工程实验室，广东 湛江 524088

摘要：为探究核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2 related factor 2,Nrf2)基因在马氏珠母贝Pinctadafucatamartensii中的作用，克隆获得了马氏珠母贝Nrf2基因的完整CDS区，分析了其序列特征，并运用实时荧光定量PCR分析Nrf2在不同组织、不同免疫刺激和营养条件下的表达模式。结果表明：马氏珠母贝Nrf2基因开放阅读框为2 652 bp，编码883个氨基酸，预测该蛋白的相对分子质量为100 150，Nrf2蛋白靠近C端处具有一个BRLZ结构域；系统进化分析显示，马氏珠母贝Nrf2氨基酸序列与长牡蛎Crassostreagigas等双壳贝类聚为一支，亲缘关系较近；荧光定量PCR分析显示，Nrf2基因在马氏珠母贝肠道、足、外套膜、闭壳肌、鳃、肝胰腺、性腺组织中均有表达，其中，肝胰腺、肠道和鳃中的表达量显著高于其他组织(P<0.05)；贝体受到LPS、PGN、Poly I:C刺激后，Nrf2在48 h时显著上调(P<0.05)，且表达量最高，分别为0 h PBS对照组的3.8、2.8、3.1倍；以螺旋藻粉、酵母粉和豆粕为主要蛋白源的饲料组中Nrf2基因表达量显著高于小球藻粉和玉米粉组(P<0.05)。研究表明，Nrf2可能参与马氏珠母贝免疫应答过程，这为分析Nrf2的生物学功能及其在机体免疫调节中的作用提供了数据资料。

关键词：马氏珠母贝,Nrf2,免疫刺激,人工配合饲料

基金资助：广东省基础与应用基础研究基金委员会青年基金项目(2019A1515111026，2020A1515010691，2021A1515011199)；国家自然科学基金(32002369)；广东省普通高校青年创新人才类项目(2019KQNCX043)；广东省农业农村厅现代农业产业技术创新团队专项(2020KJ146)；财政部和农业农村部：国家现代农业产业技术体系资助(CARS-49)