虾夷马粪海胆X染色体连锁凋亡抑制蛋白XIAP基因克隆及不同病原微生物刺激后的表达响应

来源：大连海洋大学学报杂志2022年第4期北京时间：

作者：刘圣美, 尚凤芹, 陈亚东, 常亚青, 王秀利, 仇雪梅, 刘洋

单位：大连海洋大学 农业农村部北方海水增养殖重点实验室，辽宁 大连 116023

摘要：为研究X染色体连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein，XIAP)在虾夷马粪海胆Strongylocentrotusintermedius(体质量为40～80 g)天然免疫系统中的作用，采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆获得虾夷马粪海胆XIAP基因的cDNA序列，并通过实时定量PCR分析了其在各组织中的分布,以及经脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)、肽聚糖(peptidoglycan, PGN)、聚肌胞苷酸(polyinosinic-polycytidylic acid, Poly I:C)、强壮弧菌Vibriofortis和葡聚糖(whole glucan particles, WGP)刺激后，XIAP基因在体腔细胞中的表达情况。结果表明：虾夷马粪海胆XIAP基因的cDNA长为 4 894 bp，其中，5′ UTR为459 bp，开放阅读框为2 331 bp，3′ UTR为2 104 bp，共编码776个氨基酸，具有3个BIR结构域和1个RING指环结构域，预测该蛋白相对分子质量为86 960，等电点为5.96，为酸性蛋白；虾夷马粪海胆XIAP基因在检测的各组织中均有表达，其中，在卵巢中的表达量显著高于管足、体腔细胞、围口膜、肠和精巢(P<0.05)；经PGN、LPS、Poly I:C、WGP和V.fortis刺激后，体腔细胞中的XIAP基因表达量显著上升(P<0.05)，并在PGN、LPS和Poly I:C刺激后12 h，WGP刺激后24 h，V.fortis刺激后6 h时，XIAP基因表达量均达到最高值。研究表明，克隆获得的XIAP基因参与了虾夷马粪海胆的免疫应答，并在海胆的天然免疫中发挥重要作用。

关键词：虾夷马粪海胆,X染色体连锁凋亡抑制蛋白基因,实时荧光定量PCR,脂多糖,肽聚糖,葡聚糖,聚肌胞苷酸,强壮弧菌

基金资助：国家自然科学基金(31101923)；辽宁省自然科学基金(2015020761)；农业农村部北方海水增养殖重点实验室开放课题(2014-MSENC-KF-08)