坛紫菜分离蛋白的提取与结构解析

来源：大连海洋大学学报杂志2022年第5期北京时间：

作者：陶凤庭, 潘创, 戚勃, 胡晓, 赵永强, 杨贤庆, 杨莉莉

单位：1.上海海洋大学 食品学院，上海 201306；2.中国水产科学研究院南海水产研究所 农业农村部水产品加工重点实验室国家水产品加工技术研发中心，广东 广州 510300；3.大连工业大学 海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心，辽宁 大连 116034；4.广东百维生物科技有限公司，广东 化州525100

摘要：为探究不同饱和度硫酸铵在坛紫菜Porphyrahaitanensis蛋白分离过程中对蛋白结构特征和抗氧化活性的影响，采用梯度饱和度(10%～60%)硫酸铵沉淀法从坛紫菜粗提液(crude extract ofPorphyrahaitanensis，CEPh)中制备分离蛋白，对分离蛋白的理化性质、结构和光谱特性等进行测定，并比较了分离蛋白的抗氧化活性差异。结果表明：超声波辅助磷酸盐缓冲液法的蛋白提取率最高，为55.28%；用硫酸铵对坛紫菜粗提液进行梯度分离，蛋白主要在40%～60%饱和度下沉出；紫外吸收光谱显示，当硫酸铵饱和度为30%～50%时，藻胆蛋白大量沉出；红外光谱显示，当硫酸铵饱和度超过50%时，773、1 155 cm-1处出现了2个非蛋白吸收峰；圆二色光谱显示，坛紫菜蛋白以α-螺旋结构为主，其中，分离蛋白40%-PhPI的结构最为有序；SDS-PAGE凝胶电泳显示，低饱和度(10%～30%)硫酸铵会显著增加相对分子质量为55 000、20 000和18 000的蛋白析出；抗氧化活性试验显示，不同饱和度硫酸铵提取获得的坛紫菜分离蛋白均具有一定的抗氧化活性，但活性强弱存在显著性差异(P<0.05)。研究表明，用不同饱和度硫酸铵得到的分离蛋白均表现出体外抗氧化活性，但蛋白结构特性与抗氧化活性存在较大差异。

关键词：坛紫菜,蛋白质,提取分离,抗氧化活性,光谱特性

基金资助：广东省重点领域研发计划项目(2020B1111030004)；财政部和农业农村部：国家现代农业产业技术体系资助(CARS-50)；农业农村部财政专项(NFZX2021)；中国水产科学研究院基本科研业务费资助(2020TD73)；茂名市引进创新创业团队项目(200201095834980)