《大连海洋大学学报杂志》发表论文赏析

尼罗罗非鱼跨膜Bax抑制剂母体6基因Tmbim 6的克隆、表达及功能鉴定

来源:大连海洋大学学报杂志2023年第2期北京时间:

作者:巫祎琴, 陈福暖, 张志强, 江栢坚, 简纪常, 黄瑜

单位:广东海洋大学 水产学院,广东省水产动物病害防控与健康养殖重点实验室,广东 湛江 524088

摘要:为了解跨膜Bax抑制剂母体6(transmembrane Bax inhibitor motif containing 6,TMBIM 6)在尼罗罗非鱼(Oreochromisniloticus)病原体感染中的作用,利用聚合酶链式反应(PCR)对Tmbim6基因进行克隆与鉴定,并采用实时荧光定量PCR(qPCR)分析Tmbim6在健康尼罗罗非鱼(体质量为80~100 g)的组织分布模式及无乳链球菌(Streptococcusagalactiae)、Poly I:C模拟病毒刺激后的表达变化。结果表明:尼罗罗非鱼Tmbim6开放阅读框为714 bp,可编码237个氨基酸,包含6个跨膜结构域和1个C-末端基序;亚细胞定位显示,尼罗罗非鱼TMBIM 6定位于细胞质,双荧光素酶报告基因系统检测发现,Tmbim6在HEK-293T细胞中过表达后极显著抑制NF-κB通路(P<0.01);qPCR分析显示,Tmbim6基因在所检测的组织中广泛分布,在肝脏和肌肉中的表达量最高;经无乳链球菌感染和Poly I:C刺激后,Tmbim6在肝脏、脾脏、头肾、脑和肠道中的表达水平均显著上调(P<0.05)。研究表明,尼罗罗非鱼TMBIM 6参与了无乳链球菌感染和Poly I:C刺激后的细胞应激过程及免疫反应。

关键词:尼罗罗非鱼,Tmbim&nbsp;6,亚细胞定位,NF-κB,基因表达

基金资助:国家自然科学基金(32002426,32073006);湛江市非资助科技攻关计划项目(2020B01169)

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