体外传代对大口黑鲈蛙虹彩病毒毒株毒力的影响

来源：大连海洋大学学报杂志2023年第4期北京时间：

作者：王丛旭, 潘晓艺, 周可欣, 穆雪娇, 姚嘉赟, 蔺凌云, 赵建华, 沈锦玉

单位：1.湖州师范学院 生命科学学院，浙江 湖州 313001；2.浙江省淡水水产研究所 农业农村部淡水渔业健康养殖重点实验室，浙江省鱼类健康与营养重点实验室，浙江 湖州 313001

摘要：为研究不同代次大口黑鲈蛙虹彩病毒(Largemouth bass ranavirus，LMBV)的病毒特性变化及毒力差异，采用攻毒试验、qPCR、TCID50及二代测序的方法，对LMBV分离株(LMBV-ZJDSS)F5、F35和F65进行致病性、组织中病毒载量变化、病毒滴度和不同代次病毒基因组测序，在LMBV全基组中筛选出4个毒力基因，并对不同地区毒株的毒力基因进行分析。结果表明：攻毒浓度为108.5TCID50/mL时，F5、F35和F65代毒株15 d内引起大口黑鲈(Micropterussalmoides)的死亡率分别为60%、25%和5%；F65代毒株最早产生细胞病变效应(cytopathic effect，CPE)；大口黑鲈肝脏、脾脏和肠的病毒载量较高，不同代次毒株在各组织中均有分布，96 h内F65代毒株在各器官组织的病毒载量呈上升趋势，48 h内F5代毒株在各器官组织的病毒载量呈上升趋势；对F5和F65代毒株的全基因组测序分析显示，E3、TNFR和ICP18基因编码区未发生突变，遗传稳定性较高，ICP46基因编码区有一处氨基酸由天冬氨酸突变为酪氨酸。研究表明，通过病毒的连续传代，病毒致细胞病变的速度加快，病毒对大口黑鲈的致病性减弱，病毒的毒力有所下降，毒力下降的原因可能是编码ICP46蛋白的氨基酸发生突变，且不同地区LMBV毒株毒力基因差异主要集中在TNFR上。

关键词：大口黑鲈,大口黑鲈蛙虹彩病毒,体外传代,毒力基因

基金资助：浙江省财政专项(2022CZZX003)；浙江省农业重大技术协同推广项目(2022XTTGSC01)