《大连海洋大学学报杂志》发表论文赏析

皱纹盘鲍肽聚糖识别蛋白的表达及免疫功能特性

来源:大连海洋大学学报杂志2023年第6期北京时间:

作者:乔琨, 郑春花, 陈贝, 苏永昌, 郝华, 许旻, 蔡水淋, 刘智禹

单位:1.福建省水产研究所 福建省海洋生物增养殖与高值化利用重点实验室,福建 厦门 361013;2.集美大学 海洋食品与生物工程学院,福建 厦门 361021;3.厦门大学 海洋与地球学院,福建 厦门 361102

摘要:为研究皱纹盘鲍(Haliotisdiscushannai)肽聚糖识别蛋白HdhPGRP-SC2-like的免疫功能特性,利用RACE技术克隆了HdhPGRP-SC2-like基因的全长cDNA序列,采用实时荧光定量PCR(qPCR)分析了HdhPGRP-SC2-like基因的组织分布特征,通过原核表达获得了重组蛋白rHdhPGRP-SC2-like,并对其酰胺酶活性及免疫特性进行了验证。结果表明:HdhPGRP-SC2-like基因的cDNA全长为938 bp,开放阅读框为780 bp,编码260个氨基酸,包含保守的PGRP结构域和Ami_2结构域;HdhPGRP-SC2-like属于短型PGRP,与软体动物近缘物种PGRP具有高度相似性;qPCR分析显示,HdhPGRP-SC2-likemRNA在皱纹盘鲍各组织中均有表达,其中,鳃中表达量最高,外套膜、消化腺中表达量次之,腹足和血细胞中表达量较低;进一步构建原核表达载体pET-28a(+)-HdhPGRP-SC2-like,经诱导表达、分离纯化获得重组蛋白rHdhPGRP-SC2-like,该蛋白具有肽聚糖结合活性,且在Zn2+存在的情况下显示出酰胺酶活性。研究表明,HdhPGRP-SC2-like能够结合细菌肽聚糖成分,在机体抵御入侵细菌等免疫防御中发挥重要作用。

关键词:皱纹盘鲍,肽聚糖识别蛋白,酰胺酶活性,免疫防御,细菌结合

基金资助:厦门市青年创新基金(3502Z20206002);福建省种业创新与产业化工程项目(2021FJSCZY02);福建省促进海洋与渔业产业高质量发展专项资金项目(FJHYF-L-2023-23);厦门市海洋与渔业发展专项资金资助项目(21CZP006HJ04)

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