Asb14a基因在斑马鱼肌间骨发育中的作用

来源：大连海洋大学学报杂志2024年第2期北京时间：

作者：牛明慧, 王化敏, 胡瑞芹, 胡鹏, 吴智超, 陈良标

单位：1.上海海洋大学 水产与生命学院，上海 201306；2.水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室，上海 201306

摘要：为进一步研究肌间骨(intermuscular bone)发育的分子机制，利用CRISPR/Cas9打靶技术、茜素红染色及实时荧光定量PCR方法，研究了斑马鱼(Daniorerio)Asb14a基因敲除后肌间骨的发育情况。结果表明：本研究中成功构建了插入2 bp和缺失50 bp的Asb14a基因敲除纯合斑马鱼品系；茜素红染色显示，成年Asb14a-/-突变体与野生斑马鱼相比，肌间骨数量显著减少了35%(P<0.000 1)，说明敲除Asb14a基因会减少斑马鱼肌间骨的数量；实时荧光定量PCR结果显示，骨骼发育相关基因(bmp6、sp7、sox6、alpl、collala、sox6和smad1)在Asb14a-/-突变体中的表达水平发生了显著性变化，从分子角度验证了Asb14a基因与肌间骨发育间的关联性。研究表明，Asb14a基因参与了斑马鱼肌间骨发育，敲除该基因会影响斑马鱼肌间骨的生成，这一发现为进一步研究肌间骨发育的分子机制提供了重要线索。

关键词：斑马鱼,肌间骨,CRISPR/Cas9,Asb14a基因,纯合突变体

基金资助：国家自然科学基金重点项目(32130109)；国家重点研发计划项目(2022YFD2400800)